白花蛇舌草提取物抑菌作用研究

【天地网讯】    白花蛇舌草Oldenlandia diffusa (Willd) Roxb为茜草科植物白花蛇舌草的带根全草。其叶形似蛇舌，开白花而得名。广泛分布于长江流域及以南各省市，其性味苦、甘、寒，入心、肝、脾三经，功效清热解毒，活血化瘀，消炎止痛。主治咽喉肿痛、湿热黄疸、小便不利、疮疖肿痛、急慢性胆囊炎、泌尿道感染、毒蛇咬伤等病症［1，2］。本实验研究了白花蛇舌草提取物的抑菌作用，旨在为临床应用提供理论依据。

1实验材料
    1.1菌种与培养基实验选用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和白色念球菌。白色念球菌采用沙氏琼脂培养基，其他3种均采用牛肉膏蛋白栋培养基。
    1.2实验药液的制备白花蛇舌草购于浙江省临海市中药房。称取经70℃烘干、粉碎后的白花蛇舌草10 g，分别用沸水、70%乙醇和60%丙酮提取，反复多次，直至浸出液色淡。接着将浸出液除乙醇和丙酮并浓缩到8 ml，用NaOH调pH至7.0，使沉淀完全溶解，并定容至10 ml，即1 ml提取液为1 g白花蛇舌草粉末的提取物。提取液过0.22 μm滤膜除菌，贮存于4℃备用。

2实验方法
    2.1抗菌谱初筛采用琼脂平板打孔法，接种金黄色葡萄球菌、大肠杆菌或绿脓杆菌的平皿置于37℃培养箱中培养；接种白色念球菌的平皿置于25℃培养箱中培养。
    2.2抑菌实验采用试管连续稀释法：取装有2 ml普通肉汤培养基10管，排列于试管架上，编号。接种金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌或白色念球菌。然后以无菌操作法在第1支试管中加入供试液2 ml，摇匀，吸取2 ml加第2管中，摇匀，同法稀释至第8支试管，弃去2 ml，以上各管加入预先备妥的稀释菌液(105cfu/ml)0.1 ml。第9管中只加入0.1 ml菌液作阳性对照；第10管加入2 ml供试液后混匀，弃去2 ml，余下2 ml不加菌液作阴性对照；将加入金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌的各管置于37℃培养24 h，将白色念球菌的各管置于25℃培养48 h，观察结果，确定最低抑菌浓度MIC。经培养后无菌生长的各管取20 μl涂布于固体平板上，培养24 h后观察细菌的生长状况，确定杀菌浓度MBC。

3结果
    白花蛇舌草对4种供试菌均有明显的抑杀作用，其中对金黄色葡萄球菌的抑杀效果最好，大肠杆菌次之，绿脓杆菌和白色念球菌相对较差(见表1)。
    表1白花蛇舌草提取物抗菌实验结果mg/ml（略）

4讨论
    黄酮类化合物是药用植物的一大类有效成分，具有多种生物活性，基主要作用之一是抑菌或杀菌［3］。白花蛇舌草中有丰富的黄酮、甾醇类化合物，其总黄酮提取以乙醇回流法效率最高［4］。本试验结果显示，不同提取方法的抑杀效果存在一定的差异，其中对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和大肠杆菌的抑杀效果均以乙醇提取为最好、丙酮提取其次，水提取最差，而对于白色念球菌的抑杀效果则以水提取为最好，乙醇和丙酮的提取物差别不大。说明黄酮类是白花蛇舌草抑杀菌的有效成分，同时还可能存在其他抑杀细菌的因素。

参考文献：
［1］冉先德.中华药源，第1卷(上册)［M］.黑龙江：哈尔滨出版社，1983：256256.
［2］江苏新医学院.中药大辞典［M］.上海：上海人民出版社，1977：754754.
［3］俞佩芳.三种常见药用植物抗菌作用的探讨［J］.华东师范大学学报(自然科学版)，1994，(1)：8993.
［4］毛杏飞，罗佳波.白花蛇舌草中总黄酮提取分离工艺的研究［J］.中药材，2002，25(7)：499500.